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近十年來HPLC最重要的突破。DAD可同時接收整個光譜區(qū)的信息,在色譜峰流出同時能進行每個瞬間的動態(tài)光譜掃描并快速采集信號,經(jīng)計算機處理后得到色譜- 光譜的三維圖譜,信息量大大增加。一次進樣可得到每個組分峰的定量、定性和純度信息, 靈敏度亦明顯提高。大部分抗生素在高于230 nm的光譜區(qū)無吸收,而在低于230 nm的紫外區(qū)許多樣本基質(zhì)和流動相產(chǎn)生干擾,需衍生化后測定,限制了紫外檢測器的應(yīng)用。旋光檢測有以下特點:(1)選擇性高,樣本僅需簡單提取即可; (2)靈敏度高,利用He- Ne激光作光源,靈敏度可達5～10μg水平;(3)可同時得到流出組分的比旋度,用以定性。目前,該方法已用于紅霉素、慶大霉素、羧芐青霉素和吩羧青霉素殘留的測定。

　　2. 3　高效薄層色譜(HPTLC)

　　HPTLC的出現(xiàn)使TLC進入了復(fù)興時期,現(xiàn)已成為僅次于HPLC和GC的殘留分析方法。HPTLC的斑點原位掃描定量、定性和高效分離材料(Φ3～10μm) 。改變了常規(guī)TLC在靈敏度和重現(xiàn)性方面的不足,但保持了TLC的簡便、快速和樣品容量大的優(yōu)點,可使用正相或反相板,分辨率幾乎與HPLC相當。 HPTLC在獸藥殘留的快速篩選性檢測方面應(yīng)用廣泛。

　　2. 4　超臨界流體色譜( SFC)

　　SFC可彌補GC和HPLC的不足,但不可能取代二者。SFC最大優(yōu)點是可以方便地連接各種靈敏的檢測器(MS, ECD等) ,如豬組織中磺胺類藥物等抗菌素殘留的SFC -MS分析。

　　2. 5　毛細管區(qū)域電泳(CZE)

　　CZE 是20世紀90 年代以來研究最活躍的分析技術(shù)之一。1989年開始有商品出售。CZE不同于傳統(tǒng)的凝膠電泳技術(shù), CZE使用直徑僅25～50μm的毛細管而不用載體,待測組分在高壓(20～30 kV)下泳動,截面積小,熱量和泳速均勻。所以, CZE兼有高壓電泳的高速、高分辨和HPLC靈活、高效的優(yōu)點,柱效高達106塔板/m。向電解質(zhì)中加入超臨界膠束濃度的表面活性劑,如十二烷基硫酸鈉( SDS) ,即為毛細管膠束電動色譜( cap illarymi - cellarelectrokineticchromatography,CMEC) ,分離范圍可擴展至中性或兩性分子,分離效能亦進一步提高。CZE將在簡化樣本前處理、多殘留分析和分析自動化方面發(fā)揮重要作用。目前CZE的主要問題是樣品量太小,限制了檢測的靈敏度。CZE - MS可能是最好的解決辦法。

　　2. 6　聯(lián)用技術(shù)

　　各種分析技術(shù)聯(lián)用是現(xiàn)代獸藥殘留分析乃至整個分析化學方法上的發(fā)展特點。計算機的應(yīng)用加速了這一趨勢。聯(lián)用技術(shù)可揚長避短,一般兼分離、定量和定性(分子結(jié)構(gòu)信息)于一體,因而特別適用于確證性分析